Các phương pháp xác định xâm nhiễm trong thực vật

Xâm nhiễm là một phần quan trọng của mối quan hệ giữa thực vật và các loài nấm trong rễ. Để xác định các dạng xâm nhiễm, người ta đã sử dụng nhiều phương pháp khác nhau. Trong bài viết này, chúng ta sẽ thảo luận về những phương pháp phổ biến nhất và những hạn chế của chúng. Một trong những phương pháp phổ biến nhất là sử dụng thuốc nhuộm Tryphan blue. Phương pháp này được đề xuất bởi Philip và Hayman và bao gồm việc rửa nấm rễ bằng nước cất, đun nóng bằng dung dịch KOH 10% ở nhiệt độ 90°C trong vòng 2 giờ, sau đó rửa bằng axit và nhuộm bằng Tryphan blue. Kết quả là sợi nấm sẽ bắt màu xanh. Tuy nhiệm, phương pháp này tốn thời gian và có thể gây phá hủy mẫu. Một phương pháp khác được đề xuất bởi Kormanik và cộng sự là sử dụng fuschin làm mất màu những mẫu rễ cây cần quan sát. Tuy nhiệm, phương pháp này cũng có những hạn chế tương tự như phương pháp Tryphan blue. Một phương pháp mới được đề xuất bởi Brundrett năm 1996 sử dụng thuốc nhuộm Chlorazol black E. Phương pháp này cho phép quan sát một cách rõ ràng những giai đoạn của AMF trong rễ cây chủ. Tuy nhiệm, phương pháp này cũng tốn thời gian và có thể gây phá hủy mẫu. Ngoài ra, mức độ biến đổi màu sắc của sợi nấm cũng khác nhau với từng mẫu rễ. Một số loài thuộc chi Gigaspora và Scutellospora biến đổi màu rất mạnh với Tryphan blue mà không phụ thuộc vào loài cây chủ theo Morton (1988). Tuy nhiệm, có những loài chỉ biến màu trung gian với Tryphan blue như Acaulospora trapei. Thậm chí, một số loài của chi Glomus (G leptoticum, G.maculosum...) hoặc loài Acaulospora myriocarpa lại không biến màu với Tryphan blue. Cuối cùng, để giải quyết vấn đề xác định số lượng bào tử trong đất, người ta thường sử dụng một chỉ số trung gian là "hệ số xâm nhiễm". Phương pháp đơn giản là cắt hệ thống rễ thành những mẫu nhỏ và xác định tỷ lệ Mycorrhiza. Tuy nhiệm, phương pháp này không hiệu quả khi tỷ lệ Mycorrhiza lớn. Tóm lại, xác định xâm nhiễm trong thực vật là một quá trình phức tạp và có nhiều phương pháp khác nhau được sử dụng. Tuy nhiệm, những phương pháp này đều có những hạn chế và không hoàn hảo. Việc tìm hi thêm về các phương pháp mới và cải tiến hiện có sẽ giúp chúng ta hiểu rõ hơn về mối quan hệ giữa thực vật và các loài nấm trong rễ.